반응형 세포 주기2 크로마틴에서 ATM/Wip1 활동: G2 체크포이트 지속 시간을 결정하기 위해 Plk1 재활성화 제어 DNA 손상 발생 시, FRET 기반 센서를 통해 ATM/ATR 키나제 신호가 세포주기를 촉진하는 키나제를 차단합니다. 이 과정은 DNA 손상 중점보다는 염색질 전체의 ATM 활동에 의해 제어되며, 결과적으로 손상 유발 G2 억제가 최소한의 지속 시간 동안 발생합니다. ● FRET 기반 프로브인 ATKAR를 이용하면, ATM 및 ATR의 활동을 살아있는 세포에서 직접 관찰할 수 있습니다. ● DNA 손상 발생 시, ATM 활동이 염색질 전체로 확산되어 Plk1 활동을 억제합니다. ● ATM 활동은 염색질에 결합된 인산화 효소인 Wip1에 의해 상쇄됩니다. ● DNA 손상 반응 중점에서도 ATM이 활성화되어 있음에도 불구하고, Plk1는 다시 활성화될 수 있습니다. 요약 DNA 손상이 발생한 후에는 돌연변.. 2024. 3. 10. G2 체크포인트(Checkpoint) 실험, 준비, 그리고 방법 목차 1. G2 체크포인트 2. 실험 준비 3. 샘플 고정(Fixation) 4. 샘플 준비 G2 체크포인트는 DNA 손상 시 세포의 유사분열을 차단하며, 암세포는 이 체크포인트를 비활성화하여 유전체 불안정성을 초래합니다. DNA 결합 염료를 이용해 DNA 양을 측정할 수 있으며, 히스톤 H3의 Ser10에서 인산화는 유사분열 세포를 표시합니다. 이를 통해 Anti-Histone H3 pSer10 항체, propidium iodine, 그리고 flow cytometry를 이용한 유사분열 세포의 정량화와 DNA 함량 분석 방법을 소개합니다. G2 체크포인트 G2 체크포인트는 DNA가 손상될 경우, 세포가 유사분열(mitosis)에 진입하는 것을 차단하고, 유전체의 완전성(genome integrity)을 .. 2024. 3. 9. 이전 1 다음 반응형